Разработка МС-связывающего анализа для изучения взаимодействия лекарств с ифенпродиловым сайтом связывания NMDA-рецепторов с субъединицей GluN2B
Grey L, Fabian J, Schepmann D — J Pharm Biomed Anal
Разработан и валидирован новый масс-спектрометрический (МС) метод анализа связывания для изучения взаимодействия лекарств с ифенпродиловым сайтом NMDA-рецепторов, содержащих субъединицу GluN2B. Метод заменяет радиоактивное мечение на количественное определение нерадиоактивного ифенпродила с помощью тройного квадрупольного МС. Кинетические, сатурационные и конкурентные эксперименты позволили оптимизировать условия анализа. Полученное значение Kd для ифенпродила (11 нМ) сопоставимо с результатами радиоактивного метода (7,6 нМ). Хотя МС-метод давал более высокие значения Ki для известных антагонистов NMDA-рецепторов, оба подхода показали одинаковую тенденцию.
Разработан и валидирован новый масс-спектрометрический (МС) метод анализа связывания для изучения взаимодействия лекарств с ифенпродиловым сайтом NMDA-рецепторов, содержащих субъединицу GluN2B. Метод заменяет радиоактивное мечение на количественное определение нерадиоактивного ифенпродила с помощью тройного квадрупольного МС. Кинетические, сатурационные и конкурентные эксперименты позволили оптимизировать условия анализа. Полученное значение Kd для ифенпродила (11 нМ) сопоставимо с результатами радиоактивного метода (7,6 нМ). Хотя МС-метод давал более высокие значения Ki для известных антагонистов NMDA-рецепторов, оба подхода показали одинаковую тенденцию.
**Выводы:** Разработанный МС-метод анализа связывания позволяет изучать взаимодействие препаратов с ифенпродиловым сайтом NMDA-рецепторов без использования радиоактивных лигандов, сохраняя сопоставимую точность. Метод пригоден для скрининга новых модуляторов GluN2B-субъединицы, перспективных для терапии психических и нейродегенеративных расстройств.